Resultado da pesquisa (3)
Termo utilizado na pesquisa diagnostic methods
#1 - Sarcocystis spp. detection in cattle using different diagnostic methods
Abstract in English:
Cattle are considered intermediate hosts of Sarcocystis, which can cause clinical signs and lower performance in the acute phase of infection. Sarcocystis spp. are usually not visible to the naked eye during the post mortem inspection. Moreover, fresh microscopic examination and transmission electron microscopy techniques are difficult to apply to large samples. Therefore, extensive studies on Sarcocystis infection in cattle using molecular and serological methods are required. Here, we investigated Sarcocystis spp. infection in cattle using fresh microscopic examination and polymerase chain reaction of myocardium samples and compared the results with the presence of antibodies against Sarcocystis spp. in corresponding serum samples detected using indirect fluorescent antibody test. Microscopic Sarcocystis were observed in 100% of the myocardial samples, and Sarcocystis DNA was present in 86% (43/50) of these samples. Antibodies against Sarcocystis spp. were detected in 96% (48/50) and 80% (40/50) of the serum samples at 1:25 and 1:200 dilutions, respectively. The three associated methods (fresh microscopic examination, PCR and serology) showed good sensitivity and detection for Sarcocystis spp. compared with fresh microscopic examination (only), and they may facilitate diagnosis in live animals on a large scale as well as monitoring of the herd status.
Abstract in Portuguese:
Os bovinos são considerados hospedeiros intermediários de Sarcocystis, podendo causar sinais clínicos e menor desempenho na fase aguda da infecção. Sarcocystis spp. geralmente não são visíveis a olho nu durante a inspeção post mortem. Além disso, o exame microscópico a fresco e as técnicas de microscopia eletrônica de transmissão são difíceis de aplicar a uma amostras de grande tamanho. Portanto, são necessários extensos estudos sobre a infecção por Sarcocystis em bovinos usando métodos moleculares e sorológicos. Aqui, investigamos a infecção de Sarcocystis spp. em bovinos por meio de exame microscópico a fresco e reação em cadeia da polimerase de amostras de miocárdio e comparado os resultados com a presença de anticorpos contra Sarcocystis spp. em amostras de soro correspondentes detectadas usando o teste de anticorpos fluorescentes indiretos. Sarcocistos microscópicos foram observados em 100% das amostras de miocárdio, e o DNA de Sarcocystis estava presente em 86% (43/50) dessas amostras. Anticorpos contra Sarcocystis spp. foram detectados em 96% (48/50) e 80% (40/50) das amostras de soro nas diluições 1:25 e 1:200, respectivamente. Os três métodos associados (exame microscópico a fresco, PCR e sorologia) mostraram boa sensibilidade e detecção para Sarcocystis spp. em comparação com o exame microscópico fresco (apenas) e podem facilitar o diagnóstico em animais vivos em larga escala, bem como o monitoramento do status do rebanho.
#2 - Comparison of three diagnostic methods for Salmonella enterica serovars detection in chicken rinse
Abstract in English:
Salmonella detection is a key point in food safety testing, because of the frequent association of this pathogen with food poisoning in humans. The standard bacteriological tests currently used for Salmonella-detection are time-consuming; therefore, there is a need to develop alternative methods to accelerate the detection. In order to accelerate Salmonella diagnosis, we used the immunomagnetic separation assay associated with bacteriophage P22 for the rapid detection of the following Salmonella serovars in chicken rinses of drumsticks, artificially contaminated with 5, 10, and 100 CFU/25mL of bacteria: Salmonella enterica subsp. enterica serovar Heidelberg (S. Heidelberg), Salmonella enterica subsp. enterica serovar Enteritidis (S. Enteritidis) and Salmonella enterica subsp. enterica serovar Typhimurium (S. Typhimurium). The efficiency of the technique, represented by the time required for detection of positive and negative samples, was compared with that of the standard diagnostic tests used for this pathogen, the bacteriological assay and the polymerase chain reaction (PCR)-based test. This study confirmed the ability of the bacteriophage-associated immunomagnetic separation assay to identify 99.6% of Salmonella-positive samples of the three serovars tested. In contrast, the bacteriological assay and PCR-based test detected 95.1% and 98.5% of the Salmonella-positive samples respectively.
Abstract in Portuguese:
A detecção de Salmonella é um ponto crucial para a segurança alimentar, devido a frequente associação deste patógeno com infecções alimentares em humanos. O método padrão para detecção de Salmonella é o bacteriológico, mas o tempo requerido para o processamento das amostras e o diagnóstico final é longo, por isso existe a necessidade de desenvolvimento de métodos alternativos que visem acelerar esta etapa. Para isto utilizamos a separação imunomagnética associada ao bacteriófago P22 como técnica de detecção rápida para os seguintes sorovares de Salmonella: Salmonella enterica subsp. enterica sorovar Heidelberg (S. Heidelberg), Salmonella enterica subsp. enterica sorovar Enteritidis (S. Enteritidis) e Salmonella enterica subsp. enterica sorovar Typhimurium (S. Typhimurium), os quais foram inoculados artificialmente em lavados de sobre‑coxas de frango nas seguintes concentrações: 5, 10 e 100 UFC/25mL. A eficiência da técnica, representada pelo tempo requerido para detecção de amostras positivas ou negativas, foi comparado com os testes rotineiramente utilizados para detecção de Salmonella, o exame bacteriológico e a reação em cadeia da polimerase (PCR). Este estudo confirmou a capacidade do teste de separação imunomagnética associado a bacteriófago, o qual identificou 99,6% das amostras positivas para Salmonella, dos três sorovares testados. Já o bacteriológico e PCR identificaram respectivamente 95,1% e 98,5% das amostras positivas.
#3 - Rotavirus in swine in the southem region of Brazil
Abstract in English:
The occurrence of rotavirus infection was studied in faeces of diarrhoeic swine in 32 farms of 22 municipalities from the states of Rio Grande do Sul and Santa Catarina. From a total number of 231 faecal samples collected from piglets aging 1 to 60 days, 43 (18.6%) were positive by polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE), and 42 (17.7%) were positive by an enzyme immunoassay (ELISA). With the exception of 1 sample, the electropherotypes observed were consistent with the description of classical group A rotavirus. in 5 samples rotavirus was detected by ELISA and not by PAGE, whereas the inverse occurred in 7 samples. Studies with faecal dilutions of positive faeces demonstrated that the discrepancies probably were not due to differences in virus concentration. The presence of IgG was confirmed in one sample PAGE positive - ELISA negative, suggesting the presence of immune complexes that may have interfered in the results obtained. Bacteriological and parasitological examinations in 75 samples showed the presence of enteropathogenic Escherichia coli in 8 (10.7%) samples and Treponema hyodysenteriae in 6 (8%). in no sample were parasites detected. In only one sample E. coli and rotavirus were detected together, suggesting low incidence of the association bacteria-viruses. However, the severity of the outbreak where association was detected was greater than in the others. The age distribution of rotavirus infection in the piglets showed that 90% occurred in animals between 15 and 30 days old.
Abstract in Portuguese:
A ocorrência de infecção por rotavirus foi estudada em granjas de suínos acometidos de diarréia em 32 propriedades de 22 municípios do Rio Grande do Sul e Santa Catarina. De um total de 231 amostras fecais coletadas de leitões na faixa etária de 1 a 60 dias, 43 (18,6%) foram positivas pela técnica de eletroforese em gel de poliacrilamida (PAGE) e 42 (17,7%) pelo ensaio imúnoenzimático (ELISA). Com a exceção de um caso, os eletroferotipos observados foram consistentes com a descrição dos rotavirus "clássicos" do grupo A. Em 5 amostras o rotavirus foi detectado por ELISA e não por PAGE, enquanto que a situação inversa ocorreu em 7 casos. Estudos com diluições de fezes positivas demonstraram que as discrepâncias observadas provavelmente não foram devidas a diferenças nas concentrações de vírus. A presença de IgG foi verificada em uma amostra PAGE positiva ELISA negativa, sugerindo a presença de complexos imunes que poderiam ser a causa de discrepâncias entre os métodos de diagnóstico. Exames bacteriológicos e parasitológicos em 75 amostras revelaram a presença de Escherichia coli enteropatogênica em 8 (10, 7%) e Treponema hyodysenteriae em 6 (8%). Em nenhum caso foram detectados parasitos. Em somente um caso E. coli foi encontrada em associação com rotavirus, que clinicamente mostrou maior gravidade do que nos demais. A distribuição da infecção por faixas etárias revelou que 79% dos casos foram verificados em animais de 15 a 30 dias.
